*李俊雄   俞瑜  吴清和  *郑盛杰 *阮仲立 黄真炎  杨冬娣  吴玲霓

 （*南海市中医院 528200， 广州中医药大学 510407 ）

  摘要 利用透射式电子显微镜观察自血混合丙球穴注对过敏性哮喘豚鼠肺超微结构变化情况，观察结果：丙球穴注组豚鼠肺组织内EOS、纤维组织减少；自血穴注组比丙球穴注组疗效要好。而自血混合丙球穴注组过敏性豚鼠肺组织内EOS基本消失、基底膜无增厚、胶原纤维无增生，镜下观察与正常组基本无区别。

 主题词 自血混合丙球穴注疗法 哮喘豚鼠 超微结构电镜观察

  自血混合丙球穴注疗法治疗哮喘已进行了临床研究，为了探讨其对过敏性豚鼠肺超微结构的变化情况，本实验通过建立过敏性哮喘动物模型，对各组豚鼠进行肺超微结构变化电镜观察。其变化情况为哮喘的病理过程及自血混合丙球穴注治疗哮喘提供可靠的超微结构依据。

1 .   实验动物及分组处理

  豚鼠51只，体重250克，雌雄各半，由省卫生厅实验动物场提供。随机分为7组：1）生理盐水组（8只）；2）模型组（8只）；3）阳性药物组（7只，以每次去炎松A0.225mg/只的剂量穴注）；4）自血穴注组（7只）；5）丙球穴注组（7只）；6）自血混合丙球穴注组（7只）；7）自血混合丙球穴注肌注组（7只）。

  哮喘模型的复制,参照文献方法（1），用10%卵蛋白（OA）生理盐水1ml向豚鼠腹腔内注射和4%氢氧化铝凝胶0.2ml向豚鼠后腿肌注致敏。二周后，每天以1%OA溶液喷雾（CSW-1A型雾化器，广东汕头光电研究所生产），直至哮喘发作。生理盐水组是向豚鼠腹腔内注射消毒生理盐水1ml，其余各组在造型的同时每天加双侧肺俞穴注（以各组不同的注射物）。其中自血组及自血混合丙球组的血来自豚鼠的心脏（以注射器穿刺抽取）。

  透射式电子显微镜标本制作：在乙醚麻醉下，采用快速开胸取出各组豚鼠右下肺边缘1立方毫米肺组织样品，用2.5%戍二醛前固定，1%锇酸后固定，经脱水、渗透、包埋、聚合、UITRACUT E型超薄片机切片。JEM-1200EX透射电镜观察。

2．结果

1）生理盐水组：毛细血管腔之间基底膜无增厚，无纤维组织增生。

2）模型组：纤毛柱状上皮细胞内含有大小不同的空泡，线粒体肿胀，部分纤毛结构畸变，杯状细胞增生，粘液腺肥大，EOS多数处于爆炸样脱颗粒状态，其分泌颗粒多呈椭圆形或圆形。基底膜增厚，胶原纤维增多，肺泡II型细胞增多。

3）阳性药物组：I型细胞、EOS仍增多，纤维组织增生仍存在。

4）丙球穴注组：仍有EOS，增生不明显。纤维组织无增生。

5）自血穴注组：EOS、II型细胞仍有，但增多不明显。基底膜内无纤维组织增生。

6）自血混合丙球穴注组：EOS无增多，基底膜无增厚，胶原纤维无增生，II型细胞基本正常。巨噬细胞增多较明显。

7）自血混合丙球肌注组：未发现EOS，基底膜正常，与正常组无差别。I型细胞、II型细胞与正常组基本相同。可见巨噬细胞明显增多。

3． 讨论

自血混合丙球穴注治疗哮喘是南海市中医院哮喘专科经过多年的临床实践中总结出来的行之有效的疗法。为了更好地取得实验室的支持依据，特设计了本实验，对各组豚鼠进行了肺超微结构观察。

     实验结果表明：模型组豚鼠纤毛柱状上皮细胞线粒体肿胀，粘液腺肥大，EOS多数处于爆炸样脱颗粒状态，基底膜增厚，胶原纤维增多，肺泡II型细胞增多。这与国内外其它报道是一致的（2）。阳性药物组EOS 稍有减少，但纤维组织仍还有增生，I型细胞还属增多。丙球穴注组EOS 虽已减少，但还有较少量可见，纤维组织也无增生，说明穴注丙球有效。自血穴注组EOS的减少比丙球穴注组更明显，提示自血穴注疗效更进一步。疗效比较满意的是自血混合丙球穴注治疗组，透射电子显微镜下看不到EOS，基底膜无增厚，胶原纤维无增生，II型细胞基本正常，镜下观察和正常组豚鼠肺超微结构基本无异。自血混合丙球肌注组和自血混合丙球穴注组镜下观察基本一样，这是否可能与豚鼠体积较小、肌肉注射与学位注射距离不很远有关，需继续探讨。

  通过本实验的完成，为自血混合丙球穴注治疗哮喘临床上良好的疗效提供了一个强有力证据。

参考文献：

1．吕宝璋，刘林英，田英，等.实验性过敏性哮喘动物肺组织中受体的变化.解放军医学杂志,1985，10（1）：7

2．舒茂琴，陈摩端，凌培基.抗哮喘药对豚鼠气道嗜酸球粒细胞浸润的影响.中华结核和呼吸杂志,1993，16（增刊）：30